科研工具

PCR / qPCR 配液计算器

面向常规 PCR 与 qPCR 场景,快速算清每反应配方、Master Mix 总量和建议余量。

支持 2× 预混液体系支持重复孔与额外余量支持多基因 qPCR 配液
工具切换
选择当前计算模式
当前:PCR 配液
Tips
实验小贴士
实验前复核
如何选择退火温度?

通常可先按引物 Tm 低 3-5℃ 设定梯度;若出现非特异条带,优先提高退火温度或降低引物终浓度。

查看高保真 PCR 体系
模板是否放入 Master Mix?

多样本实验建议模板单独加入,能降低交叉污染风险;同一样本批量反应时再考虑并入 Master Mix。

参数设置
输入实验条件
正在读取上次参数
保存为常用体系

可保存常用 PCR 条件,方便下次直接调用。

计算结果
Master Mix 建议

当前体系:20 uL × 8 样本 × 3 重复

总反应数
24
建议配制
26.40
Master Mix / 反应
19 uL
组分
每反应
总量
2× PCR Mix
默认按 2× 预混液计算
10 uL
264 uL
Forward Primer
10 uM stock -> 0.2 uM final
0.4 uL
10.56 uL
Reverse Primer
10 uM stock -> 0.2 uM final
0.4 uL
10.56 uL
Template
建议单独分装加入各反应孔
1 uL
26.4 uL
Nuclease-free Water
8.2 uL
216.5 uL
建议实际配制的 Master Mix 总量

501.6 uL,包含 2× PCR Mix、Forward Primer、Reverse Primer、Nuclease-free Water 模板建议在分装后逐孔加入。

现场使用建议

1. 先按建议配制量混匀 Master Mix。

2. 再根据实验需要逐孔加入模板。

3. 需要配套产品可直接查看下方推荐。

常用体系

下次打开还能继续用上次参数

保存常用反应条件,后续可直接载入复用。

还没有保存的体系。你可以先调整参数,再用上面的“保存体系”按钮把常用条件存下来。

常见问题

常见问题

整理 PCR / qPCR 配液中常见的参数与操作问题。

为什么默认不把模板计入 Master Mix?

多数实验更适合在分装后逐孔加模板,这样更容易避免污染。

建议配制反应数为什么不是整数?

系统会按总反应数加上余量,避免移液损耗导致最后几孔不够。

保存的常用体系会保留吗?

会,保存的常用体系会保留在当前浏览器中,方便下次继续使用。

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Genstar qPCR Mix
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