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RT-qPCR 分析助手

基于 2^-ΔΔCt 方法,快速完成双组相对表达量分析。

2^-ΔΔCt多重复输入支持 Excel 粘贴
参数设置
填写 Ct 数据
正在读取上次参数
重复数
一次粘贴四列 Ct 表格

支持带表头粘贴,按四列顺序自动识别。

Control · Target Gene
Control · GAPDH
Treatment · Target Gene
Treatment · GAPDH
保存为常用分析模板
分析结果
2^-ΔΔCt 结果
对照组 ΔCt
6.147
处理组 ΔCt
3.703
ΔΔCt
-2.443
相对表达量
5.439
结果摘要
Control 平均 Ct(目标 / 内参)24.253 / 18.107
Treatment 平均 Ct(目标 / 内参)21.863 / 18.160
有效重复数3
表达量对比
Control
1
Treatment
5.439
计算公式
ΔCt
Ct(target) - Ct(reference)
ΔΔCt
ΔCt(treatment) - ΔCt(control)
Relative expression
2^-ΔΔCt
Tips
实验小贴士
实验前复核
ΔΔCt 法适用前提

ΔΔCt 法要求目标基因与内参基因扩增效率接近,差异建议控制在 5% 以内;偏差较大时建议使用标准曲线或绝对定量方案。

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复孔差异大怎么办?

先检查移液、气泡、封板、扩增曲线和熔解曲线,再决定是否剔除异常孔。

内参基因不要默认固定

强刺激、分化、代谢或应激实验中,建议先比较 2-3 个候选内参的稳定性。

查看反转录试剂
Ct 高于 35 要谨慎

Ct > 35 通常接近低丰度或检测下限,建议结合阴性对照和重复结果谨慎解读。

常用模板
保存常用分析条件
0 个模板
暂无已保存模板。设置完成后可保存常用分析条件,后续直接载入。
常见问题
常见问题
适合什么场景?

适合两组样本的常规相对表达量分析,例如对照组与处理组比较。

数据怎么填写?

目标基因和内参基因建议按同一重复顺序填写,便于核对结果。

结果会保留吗?

当前参数会自动保存在本机,也可以保存为常用模板。